수혈 전 아래의 검사를 시행 후 이상이 없을때 수혈을 시행한다.
1. Anti body screening test (항체선별검사)
2. Crossmatching / X-matching (교차적합시험)
3. ABO & Rh type (혈액형검사)
A. ABO & Rh TYPE (혈액형검사)
※ ABO식 : 적혈구 막에 존재하는 항원을 검사하여 판정한다.
만약 불일치 혈액이 수혈되면 심한 급성 용혈성 부작용을 일으킬수있다.
※ Rh식 : 환자의 적혈구와 항 D항체와 반응시켜 Rh형을 결정한다.
※ 검체 채혈량,보틀 : EDTA bottle 2ml
■ 동일 혈액형으로 안전한 경우
■ 같은 혈액형이 없는 응급상황에서 불가피하게 수혈할수있는 경우
B. Antibody screening test (항체선별검사)
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수혈자의 혈청 내에 미지의 적혈구 비예기 항체의 적혈구 항원에 대한 항체) 의 존재를 검사하는 것이다.
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적혈구 표면에는 ABO 이외에도 Rh, Duffy, Kidd, Kell, Lewis 등 수많은 적혈구 항원들이 존재하는데 이들은 면역원성이 낮아 이들에 대한 항체 형성 유무를 예측하기가 어렵다. 그래서 비예기항체(unexpected antibody) 라고 부른다. 비예기항체는 반응할 수 있는 항원이 존재하는 적혈구를 수혈할 경우 용혈성 수혈부작용을 일으킬 수 있으므로 수혈하기 전에 반드시 비예기항체를 선별하는 검사를 시행하여야 한다.
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검체 체혈량,보틀 : SST bottle 1ml , EDTA bottle 1ml
종류 | 양 | 부적절검체 |
혈액(plain tube) | 5 mL | - 양 : 전혈량이 2 mL 이하- 상태 : 용혈된 혈액 - 지체 기간 : 채혈 후 24시간 이상 경과된 검체 |
B1. 검사방법
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Tube 법
1. 시험관 3개 준비 : I, II, III으로 표시합니다.
2. 각 tube에 검사하고자 하는 혈청 2 방울씩을 넣습니다.
3. I 에는 Screening Cell I을, II에는 Screening Cell II를, III에는 2-5% 피검 적혈구 (자가대조용) 1방울씩을 각각 넣습니다.
4. 잘 섞은 후 실온에서 10분 반응시킵니다.
5. 3400rpm 15초 원심후 용혈및 응집유무를 기록합니다.
6. 각각의 tube에 22% bovine albumin을 1방울씩 넣어 37℃ waterbath에서 30분간 incubation합니다.
7. 3400rpm에서 15초 원심 후 용혈 및 응집유무를 기록합니다.
8. 각각에 생리식염수를 넣어 3-4회 세척합니다. (마지막 세척후 생리식염수를 완전히 제거합니다).
9. 각각에 AHG 혈청 1 방울씩을 떨어뜨리고 잘 섞은 후 원심 후 판독합니다.
10. 반응이 음성이거나 약한 경우는 Coombs control cell 1방울 넣고 응집이 일어나는 것을 확인합니다.
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Column agglutination test (Gel test)
1. Gel Card에 환자명을 적은 후 호일을 제거합니다.
2. 0.8% 선별혈구 또는 동정혈구를 각 Microtube에 50 ㎕씩 분주합니다.
3. 각각의 Microtube에 환자의 혈청(25 ㎕)을 넣습니다.4. 37℃, 15분간 Incubation 합니다.5. Centrifugation을 10분간 시행한 후 판독합니다.
C. Antibody Identification Test
C1. 임상적 의의
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항체선별검사(antibody screening test)에서 양성으로 나오면 환자의 혈액속에 비예기항체가 존재함을 의미하므로 이 항체가 어떤 적혈구 항원에 특이성을 가진 것인지를 검사하기 위해 항체동정 검사를 시행.
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종류 | 양 | 부적절검체 |
혈액(plain tube) | 5 mL | - 양 : 전혈량이 2 mL 이하
- 상태 : 용혈된 혈액
- 지체 기간 : 채혈 후 24시간 이상 경과된 검체 |
C2. 검사방법
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Tube test
: 시험관 11개를 준비합니다.(Label 1-11번): 각각 시험관에 검사하고자 하는 혈청을 2방울씩 넣습니다.: 1-11번까지 각각의 번호에 해당되는 panel cell을 1방울 떨어뜨리고 잘 혼합한 후 실온에서 10분간 반응시킵니다.: 3400 rpm 15초 원심후 판독하여 결과를 기록합니다.: 각각의 시험관에 22% Bovine Albumin 1-2 방울 넣고 37℃에서 30분 정도 항온 시킵니다.: 3400 rpm 15초 원심후 판독하여 결과를 기록합니다.: 각각의 시험관을 생리식염수로 3-4회 washing 후 생리식염수를 완전히 제거합니다.: 시험관 각각에 AHG 혈청을 1방울 떨어뜨리고 잘 혼합합니다.: 3400 rpm 15초 원심 후 육안 및 현미경 판독하여 결과를 기록합니다.: 음성인 시험관에 IgG 감작 cell을 넣어 응집을 확인합니다.
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Column agglutination test (Gel test)
: Gel Card에 환자명을 적은 후 호일을 제거합니다.: 0.8% 선별혈구 또는 동정혈구를 각 Microtube에 50 ㎕씩 분주합니다.: 각각의 Microtube에 환자의 혈청(25 ㎕)을 넣습니다.: Incubation을 37℃에서 15분간 실시합니다.: Centrifugation을 10분간 시행한 후 판독합니다.
B. CrossMatching / X-matching (교차적합시험)
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수혈 했을 경우 체내에서 일어나는 현상을 실험실 내에서 관찰해 수혈혈액이 환자에게 적합한지 알아보는 적합성 검사이며, 용혈성 수혈부작용을 예방하기 위함이다.
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수혈할 혈액이 수혈받을 환자에게 적합한지를 판정하는 검사. 즉 수혈할 적혈구와 반응할 수 있는 항체를 환자가 지금 이미 가지고 있는지를 확인하는 검사입니다. 교차시험은 ABO 혈액형이 맞는지를 재확인하고 비예기항체에 의한 용혈성 수혈부작용을 예방하기 위해서 시행
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수혈 전 반드시 공혈자와 수혈자의 혈액을 서로 교차하여 응집반응여부를 검사하여 적합한 혈액을 선택해야한다.
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환자혈액속에 존재하는 원인항체에 대한 대응 항원이 있으면 부적합하고 대응 항원이 없으면 적합하다.
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부적합을 보이면 환자 혈청에 대해 항체선별검사를 실시하고, 항체선별검사에서 항체존재 유무를 확인하고 양성일 경우 항체동정검사를 실시한다.
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항체동정검사에서는 항체의 특이성을 동정하는데 환자 동정 항체에 대한 해당항원이 없는 혈액을 골라 출고한다.
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환자의 혈액 검체는 보통 3일만 유효한것으로 보고있어, 채혈후 3일이 지나면 다시 검체를 채혈하게 된다.
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검체 채혈량,보틀 : SST bottle 5ml검체에는 혈액은행 전용 label부착(환자등록번호,이름,성별, 나이, 채혈일, 진료과명/병실, 채혈자 서명 기록)을 부착한다.
검사방법
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Saline phase
: 시험관에 환자 혈청 2 방울을 넣습니다.: 공혈자의 2-5% 혈구 부유액을 1 방울 넣고 혼합합니다.: 3400rpm에서 15초간 원심합니다.
: 응집 및 용혈유무를 판독합니다.: 결과를 기록합니다.
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Albumin phase
: 위 시험관에 22% Bovine Albumin 1-2 방울 넣고 혼합합니다.: 37C 에서 30분간 항온시킵니다.: 3400rpm에서 15초간 원심합니다.
: 응집 또는 용혈 유무를 관찰합니다.: 결과를 기록합니다.
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Antiglobulin phase
: 위의 시험관을 가온한 식염수로 3회 세척합니다(마지막 세척후 식염수를 완전히 제거합니다).: AHG을 1-2 방울 가한후 잘 섞습니다.: 3400rpm 에서 15초간 원심분리합니다.: 응집 유무를 관찰합니다.
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참고치
: 응집 : 부적합: 비응집 : 적합
■ 수혈 지침 및 주의사항
1. 수혈전 수혈출고확인서에 환자명, 등록번호, 성별, 나이, 혈액형, 혈액번호, 혈액제제명을 기록한다.
2. 수혈 전 의사와 담당간호사는 교차시험된 혈액을 함께 확인하여 수혈스티커 확인란에 서명한다.
3. 수혈 직전 환자이름과 혈액형을 다시 확인하고 확인 중 불확실하거나 잘못된 사항은 즉시 혈액은행에 다시 한번 확인 후 이상이 없음을 확인할 때까지는 수혈을 보류한다.
4. 수혈부작용에 대해서 환자에게 미리 설명하고 환자상태와 수혈반응과 혼돈될 수 있는 증상이 있는지 확인한다.
5. 수혈 직전 환자 이름과 혈액형을 환자가 직접 대답하도록 질문하여 확인 후 수혈한다.예) 성함이 어떻게 되세요? 혈액형이 어떻게 되세요?6. 반드시 수혈세트를 이용한다. 수혈세트는 혈액백의 작은 혈구응집 및 찌꺼기 등을 걸러주는 미세필터가 갖추어져 있어 색전증을 예방할 수 있다.7. 수액제제와의 혼합시 주의사항으로 혈액제제와 혼합할 수 있는 수액제제는 생리식염수만 가능하다. 5%, 10% D/W와 혼합시 용혈반응이 일어난다. H/S와 혼합되면 칼슘이온이 혈액제제 내에 함유되어있어 항응고제의 효과를 없어지면서 혈액응고를 유발한다.8. 수혈 후 처음 15분 동안은 분당 15gtt 정도로 천천히 주입하면서 오심, 구토, 피부발진, 오한 등의 부작용을 관찰하고 이상이 없으면 지시된 속도로 주입한다.9. 4시간 이내에 수혈하도록 하는데 너무 오랜 시간 동안 혈액제제가 실온에 노출되면 세균증식의 가능성이 있다.
※ 환자 및 보호자 주의사항1. 수혈부작용에 대해서 미리 설명을 듣고, 수혈반응과 혼돈될 수 있는 증상이 있거나 의문점이 있다면 이야기 한다.2. 의사와 간호사가 수혈 직전 환자 이름과 혈액형을 묻는데 뚜렷하게 대답한다. 3. 수혈 받는 도중 오심, 구토, 피부발진, 오한 등의 증상은 수혈부작용과 관련될 수 있기에 즉시 의사나 간호사에게 이야기한다.
■ 수혈부작용 및 대처방법혈액 또는 혈액제제 수혈은 수혈부작용이란 위험을 항상 내포하고 있다. 이는 헌혈자와 수혈자간의 혈액 적합성의 정도로 결정되는 면역학적인 측면과 대부분 바이러스 등의 감염성 질환의 전파가 그것이다.
■ 수혈부작용의 일반적인 원인
1. 적합성과 특이도에 대한 주의 부족이다. 환자에게 혈구 성분이 투여되는 모든 수혈에서 ABO형과 Rh형의 적합성은 지켜져야 한다. 적혈구제제나 전혈을 수혈할 때는 공혈자와 환자 사이의 특이도 일치 검사 즉 교차시험이 시행되어야 한다. 그러나 일부에서는 교차시험에서 적합하여도 수혈부작용이 나타날 수 있다.
2. 잘못된 수혈요법의 선택, 혈액 또는 혈액제제의 저장 방법 그리고 수혈 방법에 대한 부주의 때문이다. 이는 순환계의 과부하로 인한 심부전, 용기에 적용된 고압에 의한 색전증. 개방계에서의 조작으로 인한 균혈증 및 최악의 경우 패혈증으로 진행 등, 환자에게 직접적으로 해를 줄 수 있다. 또한 동결침전제제와 신선동결혈장은 항온수조 해동과정에서 대장균, 녹농균에 오염될 가능성이 있다.
3. 공혈자 혈액의 세균 및 바이러스 오염에 의해서 때로 심각한 감염성 질병이 전파된다. 특히 신선한 전혈과 혈장의 사용은 이 위험을 증가시킨다.
